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DAPI的中文名称是4，6-联脒-2-苯基吲哚，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。其作用机理与溴化乙锭（EB）等染色剂的机理类似：它们与DNA双螺旋的凹槽部分可以发生相互作用，从而与DNA的双链紧密结合。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好UV（紫外光）的激发波长是356nm，使得DAPI成为了一种常用的荧光检测信号。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5～10μg/mL。

• 配制母液：
  用双蒸水溶解，终浓度为1mg/ml。本产品不可以用缓冲液直接溶解。-20℃可保存1年，建议分装保存，避免反复冻融。
  
• 配制工作液：
  用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作的浓度（0.5～10μg/ml）。
  
• 固定的细胞或组织染色：
  对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。
  
  • 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。
    对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3～5分钟。
    
  • 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2～3次，每次3～5分钟。
    
  • 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长358nm，发射波长461nm。
• 活细胞或组织染色：
  
  • 细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100μL染色液。
    
  • 在37℃培养细胞10～20分钟。
    
  • 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
    
  • 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长358nm，发射波长461nm。

• 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
  
• 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（货号：LA00221）。
  
• DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。